Проблема поиска и внедрения в практику препаратов, препятствующих интоксикации, возникающей при применении ряда антгельминтиков, по прежнему высоко актуальна. Это связано с двумя существенными обстоятельствами. Во-первых, в ветеринарии до сих пор применяются антгельминтики, обладающие способностью вызывать токсикоз, дисбактериоз, иммуносупрессию, а также оказывать эмбриотоксическое воздействие (например, ивермектин, фенотиазин, препараты мышьяка, кадмия, меди, соли пиперазина - особенно токсичного для кошек, левамизол, а также четыреххлористый углерод, и в наше время применяющийся при дегельминтизации домашних и сельскохозяйственных животных) (А.А.Кузьмин, 2001). Во-вторых, даже при применении современных нетоксичных антгельминтных препаратов у животных зачастую наблюдаются осложнения вызванные, по-видимому, не токсическим воздействием самих препаратов (за исключением случаев передозировки), а действием всасывающихся из кишечника продуктов распада гельминтов. Одним из наиболее токсичных антгельминтиков, до сих пор применяемых в ветеринарии, является четырёххлористый углерод (ССl4), используемый в частности для лечения токсокароза, унцинариоза, анкилостомоза. Известно, специфических антидотов, для предотвращения токсического действия ССl4, до сих пор не разработано. В качестве детоксикационных средств рекомендуются активированный уголь, а также антиоксиданты и витамины (С, В1,В12), кокарбоксилазу, липоевую кислоту, метилурацил, а в качестве антишоковой терапии – глюкокортикоиды в больших дозах и сердечные гликозиды. Одним из препаратов, обладающих антиоксидантной активностью и содержащащий необходимые в случаях тяжёлых отравлений витамины, является препарат Гамавит. В предыдущих предварительных исследованиях нами было показано, что ССl4, в дозе 0,08 мг/мышь (4 мг/кг) вызывал острый токсический шок, сопровождавшийся гибелью 75% животных при внутрибрюшинном его введении. При этом Гамавит предотвращал развитие токсического шока с последующей гибелью у 100 % животных (А.В.Санин, 2004). В целях дальнейшей отработки экспериментальной модели использования Гамавита в качестве детоксиканта при дегельминтизации животных «тяжёлыми» антгельминтиками, нами была исследована способность препарата Гамавит предотвращать развитие токсического шока у мышей, которым внутрибрюшинно вводили ССl4, в более высоких дозах – 0,8 и 0,2 мг/мышь, соответствующих 10 и 2,5 ЛД75/мышь.

В первой серии экспериментов нами была экспериментально исследована способность ССl4 вызывать острый токсический шок у мышей линии Balb/c массой 16-18 г при внутрибрюшинном способе его введения.Количество вводимого CCl4рассчитывали исходя из дозы 2350 мг/кг, составляющую ЛД50 для крыс при введении через рот (для мышей соответственно 470 мг/кг = 9,4 мг/мышь). Исходный препарат разводили в 10 раз раствором 960 этилового спирта, получая концентрацию действующего вещества 160 мг/мл; дальнейшее десятикратное разведение проводили физиологическим раствором, достигая концентрации рабочего раствора 16 мг/мл. CCl4вводили мышам внутрибрюшинно в объёмах: 0,5 мл; 0,05 мл и 0,025 мл (8, 0,8 и 0,4, 0,2 и 0,08 мг/мышь соответственно).

Регистрацию павших животных проводили в течение 7-и суток после введения ССl4 с целью выявления сравнительной динамики гибели мышей, инокулированных ССl4 и животных, которым вводили ССl4с Гамавитом.

Данные, приведённые в Таблице 1, показывают, что внутрибрюшинное введение мышам СCl4 в дозах 8, 0,8 и 0,4 , 0,2 и 0,08 мг/мышь, что соответствовало дозам: 100; 10; 5; 2,5 и 1 ЛД75/мышь соответственно, вызывало у 100% животных острый токсический шок. При этом животные, инокулированные СCl4, в дозах 8, 0,8, 0,4 и 0,2 мг/мышь гибли в течение 1-4-х суток после введения токсина (таблица 1, группы 1,2,3,4). Летальность в группе мышей, которым вводили СCl4 в дозе 0,08 мг/мышь (1 ЛД75/мышь) составила 60% (Таблица 1, группа 4). Введение мышам растворителя СCl4, (этилового спирта c физиологическим раствором, не содержавшего СCl4) не вызывало неспецифической гибели животных (Таблица 1,группа 6).

Таблица 1. Титрование CCl4 на мышах линии Balb/c массой 16-18 г

Во второй серии экспериментов нами была экспериментально исследована возможность применения Гамавита при остром токсическом шоке, вызываемом введением в организм животных высоких доз CCl4 – 10 ЛД75 и 2,5 ЛД75, вызывающих 100 % гибель животных. Препарат вводили животным подкожно (п/к) по 2-м схемам (см. Таблицу, группы 2,3,5,6) Общая вводимая доза препарата Гамавит составляла 0,15 мл/мышь - 7,5 мл/кг, что соответствовало пятнадцати разовым лечебным дозам (из расчёта одной лечебной дозы, составляющей 0,5 мл/кг).

Таблица 2. Антитоксическое действие Гамавита острой интоксикации, вызванной антгельминтиком - четырёххлористым углеродом, у мышей линии BALB/c

Данные, приведённые в Таблице 2, показывают, что ССl4 в дозе 0,8 и 0,2 мг/мышь вызвал 100% гибель животных уже на 3-и сутки после введения. При этом показатель Средней продолжительности жизни (СПЖ) составил 1,4 – 1,9 суток соответственно (Таблица 2, группы 1 и 4). Гамавит, введённый мышам дважды за 24 часа до введения токсина и через 24 часа защищал от острого токсического шока 20% животных. При этом динамика гибели животных показывает, что введение Гамавита достоверно (на 2,2 суток) увеличивало среднюю продолжительность жизни мышей, обработанных препаратом, по сравнению с таковой в контрольной группе (Таблица 2, группы 1 и 2). Гамавит, введённый мышам трёхкратно через 2, 4 и 24 часа после инокуляции токсином, не вызывал защиты мышей от острого шока (летальность в группе 3 составила 100%), при этом СПЖ животных увеличивалась незначительно (на 0,8 суток) по сравнению с контрольным показателем (Таблица 2, группы 1 и 3). Гамавит, введённый мышам трёхкратно через 2, 4 и 24 часа после инокуляции токсином, не вызывал защиты мышей от острого шока (летальность в группе 3 составила 100%), при этом СПЖ животных увеличивалась незначительно (на 0,8 суток) по сравнению с контрольным показателем (Таблица, группы 1 и 3). Однако динамика гибели животных, представленная на Рисунке, показывает, что трёхкратное введение препарата задерживает проявление токсического шока в течение первых 2-х суток после введения токсина. Аналогичные результаты были получены при введении мышам, инокулированным ССl4в дозе 0,2 мг/мышь, Гамавита трёхкратно по 2-м схемам:1) за 24 часа, одновременно и через 24 часа; 2) одновременно, через 2 и 24 часа относительно введения токсина (Таблица 2, группы 5 и 6). Гамавит, использованный по первой схеме, предотвращал гибель животных от токсического шока в 17% случаев и достоверно увеличивал (на 1,8 суток) показатель СПЖ по сравнению с таковой в контроле (Таблица 2, группы 4 и 5). 2-я схема оказалась неэффективной: показали летальности и СПЖ у таких животных не отличались от контрольных (Таблица 2, группы 4 и 6).

Полученные экспериментальные данные, на наш взгляд, свидетельствуют о том, что Гамавит обладает антитоксическим действием при введении высоких доз СCl4 – 10 и 2,5 ЛД75. При этом эффективными были 2 схемы аппликации Гамавита: 1) двукратное введение препарата за 24 часа и через 24 часа после введения ССl4 ; 2) трёхратное – за 24, одновременно и через 24 часа после инокуляции ССl4.

Ранее, на модели острого летального клещевого энцефалита (КЭ) у мышей, нами было установлено, что введение Гамавита животным, инфицированным высокой дозой вируса (100 ЛД50), не предотвращало развитие клинически выраженного энцефалита, однако значительно (на 4,4 суток) увеличивало СПЖ мышей, заражённых вирусом и обработанных препаратом, по сравнению с таковой у животных, которых инфицировали вирусом, но не вводили Гамавит. Учитывая тот факт, что клинически выраженный КЭ, как и другие острые вирусные инфекции, сопровождается развитием в организме «цитокинового шока», который может быть причиной быстрой смерти, нами был сделан вывод о том, что Гамавит может быть рекомендован в качестве средства поддерживающей и антишоковой терапии при тяжёлых вирусных инфекциях.

Полученные данные подтверждают высокую эффективность препарата Гамавит в качестве антитоксического средства и обосновывают рекомендации к применению препарата при дегельминтизации животных «тяжёлыми» антгельминтиками. Исключительно высокая антитоксическая эффективность Гамавита проявляется, прежде всего, в обезвреживании вредных продуктов распада, а также в нормализации нарушенных в результате их воздействия функций. По-видимому, эти эффекты связаны с взаимно усиливающим действием L-глютаминовой кислоты, глицина, аргинина, лизина, нуклеината натрия и других компонентов Гамавита. Так, L-глютаминовая кислота, входящая в состав препарата, обезвреживает токсичные азотистые шлаки. Глютаминовая кислота также обладает способностью связывать эндогенный аммиак, накапливающийся в избыточных (токсических) количествах при нарушении детоксикационной функции печени. Это позволяет предупредить развитие печеночной комы, а также интоксикацию аммиаком головного мозга. Лизин оказывает терапевтическое воздействие на печень при нарушениях ее функций. Глицин нормализует состояние нервной системы при стрессах и интоксикациях, а также проявляет свойства детоксиканта при различных интоксикациях. Аргинин способен нормализовать перекисное окисление липидов и активировать репаративные процессы в клетках печени, что приводит к устранению цитолитического синдрома, снижению уровня билирубина, нормализации метаболизма и повышению адаптационных способностей организма. Нуклеинат натрия, тоже входящий в состав гамавита, способствует устранению токсических эффектов антипаразитарных препаратов, а также (наряду с витаминами и экстрактом плаценты) - восстановлению и нормализации метаболизма. По-видимому, сочетанным синергидным действием этих и других компонентов и объясняется исключительно высокая антитоксическая эффективность Гамавита, поскольку явное снижение признаков интоксикации у больных животных можно наблюдать буквально в считанные минуты после его внутривенного введения. Гамавит можно использовать при проведении дегельминтизации у любых видов домашних и сельскохозяйственных животных.

В настоящее время под наблюдением находятся животные, у которых введение ССl4 в дозах 0,008, 0,009 и 0,01 мг/мышь не вызвало острого токсикоза. Предполагается обследование внутренних органов таких животных с целью выявления развития в них злокачественных опухолей. В дальнейших исследованиях мы планируем введение Гамавита животным на фоне введения тех доз ССl4, которые не обладая острой токсичностью, вызывают развитие онкологических процессов (например, в печени), с целью экспериментального доказательства адекватности применения Гамавита для предотвращения опасных для организма животных побочных эффектов при использовании «тяжёлых» антгельминтиков или других высокотоксичных препаратов.

В дальнейшем предполагается исследование антитоксического действия Гамавита при пероральном введении ССl4 и обследование внутренних органов животных (печени, почек) с целью доказательства отсутствия поражений, например, опухолей печени, у животных, которым вводили ССl4и обрабатывали препаратом.

Литература

1. Васильев И.К., И.М.Фурман, Шелапутина И.А., Зинкина Т.С., Богаутдинова Т.В., Федорченко О.А., Санин А.В. Бабезиоз собак – новый подход к лечению. Ветеринарная клиника. 2003. Май. с.6-9.

2. Карпенко А.И., Андриевская А.А., Никитин О.А., Савельева Т.С., Кюнг Ю.В., Липин С.М., Савойская С.Л., Ильченко Е.Д., Санин А.В. Повышение эффективности комплексной терапии инфекционных и инвазионных заболеваний у мелких домашних животных с помощью препарата гамавит. Киев VII Межд. Конф. по проблемам ветеринарного обслуживания мелких домашних животных. 2-5 октября 2002.

3. Кузьмин А.А. Антгельминтики в ветеринарной медицине. Аквариум, 2001,144 стр.

4. Макеева М.В. Схема лечения мелких домашних животных при подтвержденном диагнозе хламидиоз. Зооиндустрия. 2001, N 10, с.34-35.

5. Никитин О.А. Терапевтическая эффективность гамавита при лечении мелких домашних животных. Зооиндустрия, 2003,N5, с.28.

6. Санин А.В. Выбор антгельминтных средств и основы дегельминтизации. Ветеринарная клиника. 2003 N12, c.18-20.

7. Санин А.В., Васильев И.К., Годунов Р.С., Ожерелков С.В. Экспериментальное обоснование применения Гамавита при дегельминтизации животных четырёххлористым углеродом. «Ветеринарная медицина домашних животных», Сб. статей, Вып.1, Казань, 2004 г., С. 27-30.

Материалы V научно – практической конференции «Ветеринарная медицина. Современные проблемы и перспективы развития». Саратов 2005 г.