Промышленное птицеводство в настоящее время динамично развивается.
Разработана концепция развития отрасли до 2010 г., в рамках которой определено направление, предусматривающее разработку и использование новых средств терапии и профилактики болезней, а также естественных стимуляторов для получения экологически безопасной для человека продукции (7). Обстановка в отрасли остается достаточно сложной: за 2001 год погибло 72 млн. голов птицы (7,4% от общего поголовья). Основной причиной гибели птиц являются инфекционные заболевания: болезни Гамборо и Марека, инфекционный бронхит, энцефаломиелит, ларинготрахеит, вирусный гидроперикардит, колибактериоз, микоплазмоз и некоторые другие заболевания (2).
Невосприимчивость птицы к инфекционным заболеваниям решающим образом зависит от функционального состояния иммунной системы организма, на которое оказывают воздействие разные иммунодепрессивные факторы. Например: нарушение норм кормления и содержания птицы, низкое качество кормов, их обсемененность условнопатогенной микрофлорой, программа прививок и другие причины (5).
Кроме того, существенное воздействие на иммунитет также могут оказывать вирусы, бактерии, микоплазмы и другие инфекционные агенты. Среди возбудителей, подавляющих функционирование иммунной системы, особо выделяются вирус инфекционного бронхита кур (ИБ), вирус болезни Ньюкасла (БН), вирус инфекционной бурсальной болезни (ИББ) и другие. Они, в основном, проявляют тропизм к лимфоидным клеткам, вызывают их разрушение, и блокируют иммунный ответ птицы (9).
Поражение иммунной системы вирусами приводит к иммунодефициту, снижая тем самым способность птицы противостоять другим возбудителям инфекционных болезней. В результате у птиц развивается повышенная восприимчивость к инфекционным заболеваниям.
Характер и степень повреждения иммунной системы зависит от возраста, в котором произошло инфицирование, наличия пассивного иммунитета и возможных осложнений болезни другими вирусными заболеваниями.
Вызывающие иммунодепрессию вирусные болезни существенно влияют на экономические показатели птицехозяйств, приводя к прямым и косвенным потерям. Прямой ущерб связан с гибелью зараженной птицы. Он зависит от вирулентности возбудителя, состояния естественной резистентности птицы, наличия у нее пассивного иммунитета. Косвенные экономические потери обусловлены снижением привесов и яичной продуктивности, снижением иммунологического ответа на проводимые вакцинации, проявлением секундарных инфекций (колибактериоз), осложненным течением других болезней (инфекционный бронхит, микоплазмоз, кокцидиоз и др.).
Для повышения иммунного ответа птицы на проводимые специфические календарные мероприятия в условиях интенсивного ведения отрасли, все чаще используют препараты, стимулирующие естественную резистентность и иммунный ответ организма птицы. Одним из таких препаратов является Фоспренил - производное полипренолов, получаемых из хвои сосны.
Полипренолы - интегральные компоненты биологических мембран клеток всех живых организмов. Они влияют на многие физико-химические и структурно-функциональные свойства мембран (текучесть, проницаемость, температуру фазового перехода, образование небислойных структур). В фосфорилированном виде эти соединения выполняют роль промежуточных акцепторов углеводных остатков в процессе биосинтеза гликопротеинов ( 8 ).
Фосфорилированные полипренолы характеризуются следующими свойствами:
- обладают противовирусной активностью по отношению к вирусам человека и животных, имеющим суперкапсидную оболочку (10,11;4);
- стимулируют естественную резистентность и продукцию цитокинов в условиях экспериментального моделирования (12,13);
- у здорового молодняка КРС - активизируют метаболические процессы, рост и развитие, стимулируют механизмы неспецифической защиты, повышают напряженность иммунитета при вакцинации от бактериальных инфекций (6);
- у здоровых собак - стимулируют вакцинальный иммунитет при вакцинации от вирусных инфекций (1);
В ветеринарной практике фосфорилированные полипренолы применяют под коммерческим названием Фоспренил с 1996 года для лечения и неспецифической профилактики вирусных заболеваний собак. Результаты клинических испытаний на собаках со спонтанными инфекционными вирусными заболеваниями подтвердили, что фоспренил обладает противовирусной активностью и стимулирует естественную резистентность. Препарат безвреден.
В связи с изложенным, выяснение эффекта и целесообразности применения фоспренила в условиях промышленного птицеводства представляло большой интерес и явилось целью нашего исследования.
Первый опыт по изучению влияния препарата фоспренил на иммунный ответ птицы на фоне ее календарной иммунизации противовирусными вакцинами проводили в 2002 году в ЗАО АПК "Великий Новгород", специализирующемся на откорме бройлеров.
На откорм поступили цыплята-бройлеры кросса "Ross-308". Были сформированы 2 группы: опытная в количестве 19700 голов и контрольная в количестве 19500 голов. Цыплята получены от родительского стада возраста 325 дней.
При посадке на откорм в суточном возрасте вес одного цыпленка в среднем составлял 40±0,2 г. Цыплята-бройлеры содержались напольно при плотности посадки 19 голов на квадратный м. Поение ниппельное из расчета 18 голов на 1 ниппель. Фронт кормления 65 голов на 1 кормушку. При откорме бройлеров применялся гранулированный комбикорм.
Всех птиц вакцинировали живыми противовирусными вакцинами по следующей схеме:
- 1 сутки - против инфекционного бронхита кур (ИБ) вакциной из штамма Н-120, методом спрей;
- 10 сутки - против ИБ кур методом выпаивания;
- 14 сутки – против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) вакциной из штамма "Винтерфильд", методом выпаивания;
- 19 сутки – против ньюкаслской болезни (НБ) вирус-вакциной из штамма "Ла Сота" методом выпаивания.
В опытной группе перед каждой вакцинацией (менее чем за 6 чесов) был использован фоспренил (0,4% раствор фосфорилированных полипренолов) в дозе 0,05 мл\кг живой массы. Нужный объем препарата в мл рассчитывали исходя из количества и массы обрабатываемых цыплят. Рассчитанный объем препарата заливали в сосуд (для вводимых веществ) медикатора. В медикаторе фоспренил дозировано разводил еще в 100 раз в дистиллированной воде; с последующей подачей раствора на ниппельные поилки. Цыплята ( из расчета 18 голов на один ниппель) выпивали раствор в течение 3 часов.
В контрольной группе препарат не применяли, но были созданы аналогичные условия содержания цыплят.
В процессе проведения опыта учитывалось: клиническое состояние птицы, показатели сохранности, среднесуточные привесы, затраты корма на центнер привеса, выход продукции. Учет результатов проводился на 1, 7, 14, 21, 28, 35 и 40 дни. Отбор проб сыворотки крови с целью серологического исследования на наличие приобретенного иммунитета (после мер специфической профилактики) против НБ, ИБ, ИББ проводили непосредственно перед убоем птицы.
Лабораторные исследования по определению напряженности иммунитета (на основе определения титров противовирусных антител) против НБ проводились в Новгородской областной ветеринарной лаборатории методом РТГА, против инфекционного бронхита кур и инфекционной бурсальной болезни проводились лабораторией «Биочек» методом ИФА.
Проведенные исследования показали, что при применении препарата фоспренил совместно с проведением мер специфической профилактики у цыплят-бройлеров получены положительные результаты.
Показатели сохранности цыплят-бройлеров в опытной и контрольной группах представлены в таблице № 1. Сохранность ( выраженная в % от исходного числа птиц) в опытной группе к концу опыта была 92,17%, в контрольной - 90,7%. Разница между опытной и контрольной группами равнялась 1,47%, что составило дополнительно сохраненных 288 голов птицы.
В опытной группе птицы быстрее набирали живую массу. Средние показатели живой массы в различные сроки опыта представлены в таблице № 2 (расчет средней живой массы произведен по выборке 100 голов).
Таблица №1. Влияние фоспренила на сохранность поголовья бройлеров (число голов, %)
1 день | 7 день | 14 день | 21 день | 28 день | 35 день | 40 день | |
Контроль | 100% | 97,89% | 96,92% | 96,6% | 95,7% | 92,87% | 90,7% |
Число голов | 19500 | 19090±95 | 18900±95 | 18837±94 | 18661±93 | 18110±90 | 17686±88 |
Опыт | 100% | 98,55% | 98,04% | 97,26% | 96,26% | 93,29% | 92,17% |
Число голов | 19700 | 19414±97 | 19314±96 | 19160±96 | 18964±95 | 18378±92 | 18158±91 |
Таблица № 2. Влияние фоспренила на увеличение живой массы у бройлев ( на одного цыпленка).
1 день | 7 день | 14 день | 21 день | 28 день | 35 день | 40 день | |
Контроль | 40±0,2 | 154±0,77 | 353±1,77 | 745±3,73 | 1110±5,55 | 1500±7,5 | 1800±9 |
Опыт | 40±0,2 | 158±0,77 | 390±1,95 | 790±3,95 | 1160±5,8 | 1600±8 | 1934±9,67 |
Согласно представленным данным средняя живая масса цыпленка в возрасте 40 дней в опытной группе составила 1934 грамма, а в контрольной группе 1800 граммов. Выявленная разница составила 134 грамма. Это более, чем в три раза отличается от среднего разброса по живой массе, равного при такой выборке 40г. При этом разница между суммарной живой массой всех цыплят опытной группы и суммарной живой массой контрольных птиц (при условии уравнивания исходного числа цыплят в опытной и контрольной группе до 19500) к 40 дню составила 2680 кг.
Затраты корма на 1 центнер привеса в опытной группе составили 1,9 центнера, а в контрольной группе 1,98 центнеров.
При убое бройлеров опытной группы выход мяса составил 70% (в контроле 66%). Отмечено повышение категорийности мяса. К первой категории в опыте было отнесено 75% тушек, в контроле 70%. Количество нестандартных тушек уменьшилось. В опыте было 4,8%, в контроле 7,5% .
С целью проведения серологических исследований на наличие АТ против болезни Ньюкасла (возбудитель парамиксовирус) производили отбор проб сыворотки крови на 20 день после вакцинации у 36 цыплят (возраст 38 дней). Из опытной группы в выборке было 20 голов птицы, а из контрольной группы - 16 голов. У всех исследованных птиц опытной группы были выявлены протективные титры антител (АТ) от 1:8 до 1:512, что означает , что 100% исследованного поголовья имеет иммунологическую защиту ( рис 1).
В контроле к указанному сроку появляются птицы с титром АТ 1:4, который не является протективным. Их в выборке 18%. Эти птицы иммунологически не защищены и являются потенциально опасными, как возможный источник заболевания. Иммунологически защищенных птиц в контроле 82% (рис1).
При анализе титров АТ к вирусу болезни Гамборо (возбудитель реовирус) в опытной группе (16 голов) у всех птиц обнаружили протективные титры АТ, т.е. на 24 день после вакцинации все 100% птиц иммунологически защищены. Средний титр равен 1:8489 (норма 1:2500 – 1:10000), коэффициент вариации равен 43 (норма 20 - 45). Средний титр и коэффициент вариации соответствует норме, принятой в лаборатории.
В контрольной группе (10 голов) у трех птиц получены низкие не протективные титры АТ (1:63). Таким образом, количество иммунологически защищенных птиц в контроле составила 70%. Среднее значение титров в контроле ниже нормы: 1:809 (при норме 1:2500-1:10000), коэффициент вариации - высокий: равен 81 (норма 20-45).
При анализе титров АТ к вирусу инфекционного бронхита кур (возбудитель коронавирус) показано, что в опытной группе (16 голов) на 28 день после вакцинации только у одной птицы титры антител низкие, не протективные (1:221). Таким образом, количество иммунологически защищенных птиц в опытной группе равно 94%. Средний титр 1:1094 (при норме 600-3000), коэффициент вариации 41 (норма 20-60), что соответствует норме принятой в лаборатории. Тогда как в контроле (10 голов) протективный титр имела только одна птица (1:821). Количество иммунологически защищенных птиц в контрольной группе - 10%. Средний титр антител низкий:1:208 , а коэффициент вариации - высокий 108.
В данном исследовании получены убедительные данные, показывающие что препарат фоспренил оказывает положительное влияние на уровень и длительность протективного гуморального иммунитета у кур в ответ на живые вакцины против БН,ИББ,ИБ.
Возраст птицы является одним из факторов обуславливающих активность лимфоидной ткани, у молодых особей она более активна. Поэтому, на наш взгляд, введение фоспренила в первый день жизни способствует наиболее оптимальному проявлению его стимулирующего эффекта.
К моменту убоя в опытной популяции преобладали птицы с высокими, протективными титрами АТ. Это свидетельствует о том ,что фоспренил не только не препятствует развитию вакцинального процесса, а напротив стимулирует иммунный ответ на вакцины.
В то время как в контроле в аналогичный срок выявляются птицы с низкими непротективными титрами АТ. Эти птицы представляют собой потенциальный очаг размножения вирусов и распространения вирусной инфекции.
Интересно отметить, что все использованные вакцинные препараты относились к категории «живых вакцин», однако, не только уровень иммунного ответа на них , но и переносимость их организмом цыплят на фоне применения фоспренила лучше. Об этом свидетельствуют показатели сохранности и привесов.
Более высокий, по уровню специфических АТ, ответ на вакцины разработчики препарата связывают со стимулирующим эффектом фосфорилированных полипренолов на макрофагальные клетки организма животных и птиц.
Макрофаги широко представлены в организме птиц. При стимуляции макрофагов повышается уровень миграционной, фагоцитарной и лизосомальной активности, который коррелирует с уровнем естественной резистентности птицы. Повышается у активированных макрофагов также и способность презентировать поступивший в организм антиген (вместе с молекулами главного комплекса гистосовместимости) Т - лимфоцитам хелперам, которые, в свою очередь, с одной стороны стимулируют В-клетки к трансформации в плазматические клетки , продуцирующие антитела, а с другой – обеспечивают необходимый уровень и длительность иммунологической памяти.
Ранее нами было показано, что активированные фоспренилом макрофаги продуцируют более высокий уровень интерлейкина 1, который оказывает регулирующее влияние на развитие воспалительной реакции и, одновременно, является медиатором запускающим пролиферацию Т-лимфоцитов хелперов, активность которых и определяет уровень иммунного ответа.
Итак, получены доказательства положительного влияния препарата фоспренил на уровень и длительность протективного гуморального иммунитета у цыплят-бройлеров. Наряду с этим у птиц отмечено увеличение сохранности и привесов, улучшение качества мяса и снижение затрат корма на единицу продукции.
К 38 дню жизни отмечена 100% напряженность иммунитета к болезни Ньюкасла и Гамборо. Все птицы имеют защищающие титры антител. Особенно хочется обратить внимание на напряженность иммунитета к инфекционному бронхиту кур: в опыте - 94 % , а в контроле 10%.
Таким образом, препарат фоспренил повышает уровень и увеличивает длительность протективного гуморального иммунитета. Наряду с этим применение фоспренила повлекло за собой улучшение сохранности поголовья цыплят, увеличение привесов, выхода и качества мяса, снижение затрат корма на единицу продукции.
Побочных эффектов токсического характера при применении препарата Фоспренил за период выращивания цыплят-бройлеров обнаружено не было: цыплята характеризовались спокойным поведением, равномерно распределялись по залу, активно потребляли корм и воду в течение всего периода откорма.
Предотвращение с использованием фоспренила только прямых экономических потерь (обусловленных увеличением сохранности) обуславливает экономическую эффективность применения препарата. При этом на 1 рубль затрат было получено 16 рублей прибыли.
При оценке предотвращения косвенных экономических потерь (обусловленных снижением продуктивности) выявлено, что после применения фоспренила получили дополнительно 2680 кг валового выхода живой массы.
Заключение.Всесторонний анализ результатов представленной работы позволяет сделать вывод о целесообразности применения препарата Фоспренил при откорме цыплят-бройлеров.
Авторы выражают признательность разработчикам и производителям препарата Фоспренил.
Список литературы
1. Аржаев А.М., Ожерелков С.В. с соавт. «Препарат Фоспренил стимулирует вакцинальный иммунитет у собак при совместном введении с антирабической вакциной» \\ 2-я региональная конференция «Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе» п.Персияновский,Май,1999, стр.6-7)
2. Венгренко Л. "Залог успеха - здоровая птица". /Животноводство России №5 май 2002 г., С. 24-25).
3. Деева.А.В., Ожерелков С.В. с соавт. "Фоспренил - противовирусный препарат широкого спектра действия" / Ветеринар, 1998, №3, Стр.15-21.
4. Ожерелков С.В., Белоусова Р.В. с соавт. «Препарат Фоспренил подавляет размножение вирусов диареи и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота в чувствительных культурах клеток.»\\ Вопр. Вирусологии.-2000, -Т.5)
5. Конопатов Ю.В., Макеева Е.Е. "Основы иммунитета и кормление сельскохозяйственной птицы", Санкт-Петербург, 2000г., 120 С.)
6. Ракова Т.Н., Деева А.В. «Влияние Фоспренила на неспецифическую резистентность и иммунологическую реактивность телят» Международная научно-производственная конференция, посвященная 100-летию со дня рождения члена-корреспондента ВАСХНИЛ В.Т. Котова «Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных» г. Воронеж, май, 1999, стр.224-225)
7. Фиснн В "Российское птицеводство на фоне мировых тенденций"./ Животноводство России, №4 апрель 2002 г., С. 3-5.
8. Danilov L.L., Maltsev S.D. et al. "Phosprenyl: A Novel Drug with Antiviral and Immunomodulatory Activity"\ Archivum Immunologiae and Therappiae Experimentalis, Aiteat, 1996, 44, 395-400.
9. Монтиэль Э., "Значение иммунной системы для промышленного птицеводства. Ключевая роль иммунодефицита причины и следствия. 1998. С.2-4.
10. Pronin A., Ozherelkov S., et al. “Antiviral activity of the Fosprenil preparation at some experimental viral infections”\International Islamic medical Journal, 1996, V.1,N3&4, p.83-87;
11. Pronin A.V., Ozherelkov S.V. et al. “Phosprenyl: a novel drug active against animal and human viruses”\\First congress of the European Society for Emerging Infections, Budapest, Hungary, September,1998,p.98;
12 .Pronin A.V., Ozherelkov S.V. et al. ”Role of Cytokines in Immunomodulatory effects of Polyprenyl phosphate: New generation of antiviral Drugs”\\ Russian Journal of Immunology. 2000, V.5, N.2, р.155-164),
13. Sanin A.V., Narovlyansky A.N. et al. ”Phosprenyl – a novel stimulator of Natural resistance”\\ Eur. Cytokine Netw., 1998, V.9, N.3, 537;